Diese von 1606 bis 1609 errichtete Kapelle zeigt anhand von Statuen von Cristoforo Prestinari den Heiligen Franziskus wie er sich in der Kirche San Damiano ans Kreuz wendet, um zu fragen, welche Richtung er in seinem Leben einschlagen soll. Die Originalskulpturen, von denen nur das Kreuz und die Engel übrig geblieben sind, wurden in der zweiten Hälfte des 17. Jahrhunderts von Dionigi Bussola mit Figuren im Barockstil renoviert. Die Kirche wurde 1608 von den Fiammenghini genannten Brüdern Della Rovere mit Fresken versehen, die von rechts beginnend folgende Szenen darstellen: Franziskus, der, als er krank aus dem Gefängnis von Perugia zurückkommt, die Eitelkeit der Welt versteht; Franziskus, der nach seiner Genesung auf dem Land auf einen verarmten adligen Ritter trifft, dem er seine Kleider gibt; Franziskus, als ihm im Traum der Herrgott erscheint, der ihm die Waffen, die das Kreuzzeichen tragen, zeigt und ihm verkündet, dass diese für ihn und seine Gefährten seien; Franziskus, als er den erschienenen an Lepra erkrankten Jesus umarmt und ihm sein Geld schenkt.
